بررسی مولکولی و مورفولوژیک ژنهای پلاست آگروباکتریوم ریزوژنز

یکی از دغدغه های محقّقان جهت ایجاد صفات برتر در موجودات زنده، انتخاب و به کارگیری روش هایی است که علی رغم کارایی بالا، کمترین آثار مخرّب را بر روی موجودات زنده داشته باشند. امروزه استفاده از روش انتقال ژن با استفاده از باکتری آگروباکتریوم (agrobacterium) به عنوان یکی از تکنیک های کارآمد، جهت دستیابی به اهداف ژنتیکی و یا ایجاد فنوتیپ برتر، در میان محقّقان طرفداران فراوانی پیدا کرده است. از جنبه های کاربردی این تکنیک، می توان به تولید گیاهانی با ارزش اقتصادی بالا اشاره کرد. آگروباکتریوم دارای ژن های قابل انتقال (ناحیه ای از پلاسمید به نام t-dna ) به میزبان گیاهی است، از این رو این باکتری یکی از مهمترین ابزارهای انتقال ژن در علم ژنتیک مولکولی محسوب می شود. ژن های rol (rooting locus) بر روی dna t- قرار دارند که باعث ایجاد تغییرات مورفولوژیک و رشد و نموی در گیاه می شوند. پژوهش حاضر با هدف بررسی تاثیر ژن پلاست rolc از پلاسمید ri باکتری agrobacterium rhizogenes بر رشد و نمو گیاه nicotiana tabacum انجام گرفته است. در این تحقیق با استفاده از گیاهان تراریخته ی توتون، ابتدا dna آن ها مورد استخراج قرار گرفت و پس از اطمینان از انتقال صحیح ژن های مورد نظر، با القاء ژن های انتقال یافته توسط دگزامتازون، استخراج rna، سنتز cdna و در نهایت واکنش pcr بر روی نمونه ها با پرایمر های مختلف ژنوم کلروپلاستی انجام گرفت. همانگونه که انتظار می رفت، بیان ژن های کلروپلاستی خاصی همچون psba در گیاهان تراریخت که rolc یا trolc را بیان می نمودند و فنوتیپ کلروزه داشتند مورد تایید قرار گرفت.